CHES Buffer,0.5M,pH9.5

編號(hào):25-01430

規(guī)格:100 mL

1．感受態(tài)的制備

（1）CHES BUFFER,0.5M,PH9.5接種單菌落于2ml LB培養(yǎng)液中，37℃過(guò)夜。

（2）取0.25ml過(guò)夜菌入25ml LB培養(yǎng)液中，37℃振搖4～6h至A590=0.4～0.6。

（3）倒入50ml管內(nèi)，水浴10min，以2500～3000rpm離心5min，棄上清。

（4）緩慢加入75mmol/L預(yù)冷CaCl25ml懸浮菌體，冰浴20min，同上離心棄上清。

（5）緩慢加入75mmol/L預(yù)冷CaCl21.0ml輕輕混勻后分裝在1.5ml Eppendorf管中，每管200μl，冰浴1～2h。

2．重組DNA的轉(zhuǎn)化

（1）將3只Eppendorf管按下列轉(zhuǎn)化項(xiàng)目作好標(biāo)記：

（2）冰浴30min至1h。中間搖動(dòng)3次，以防受體菌沉底。

（3）42℃90s。

（4）37℃水浴5min。

（5）CHES BUFFER,0.5M,PH9.5加入無(wú)相應(yīng)抗生素的Lb 200μl，混勻后，37℃水浴30～60min。

（6）分別取3組反應(yīng)物各50μl在含相應(yīng)抗生素的固體LB培養(yǎng)基平皿上涂布，室溫下干燥，然后倒置于37℃溫箱中培養(yǎng)過(guò)夜。 

基因工程:有目的的通過(guò)分子克隆技術(shù)，人為的操作改造基因，改變生物遺傳性狀的系列過(guò)程。

CHES BUFFER,0.5M,PH9.5載體:能在連接酶的作用下和外源DNA 片段連接并運(yùn)送DNA 分子進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA 分子。

轉(zhuǎn)化:指質(zhì)粒DNA 或以它為載體構(gòu)建的重組DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過(guò)程。

感染:以噬菌體、粘性質(zhì)粒和真核細(xì)胞病毒為載體的重組DNA 分子，在體外經(jīng)過(guò)包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，才能感染適當(dāng)?shù)募?xì)胞，并在細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)增。

轉(zhuǎn)導(dǎo):指以噬菌體為載體，CHES BUFFER,0.5M,PH9.5在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移DNA 的過(guò)程，有時(shí)也指在真核細(xì)胞之間通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細(xì)胞DNA 的過(guò)程。

轉(zhuǎn)染:指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過(guò)程。

 AC1201-01Sealing film(25)

AC1201-02Sealing film(100)

AC1331-01Multi-Channel Diposable reservoir(10pk)

AC1332-0112-channel reservoir(5/pk.4pk/case)

FL9601E-Z 96 Lysate Clearance Plate（10）

FL9602E-Z 97 Lysate Clearance Plate（100）

HCR003Homogenizer Spin Column(200)

HCR9601-01EZ 96  Homogenization plate（4）

HCR9601-02EZ 96  Homogenization plate（1）

E1091Rnase Free Dnase Set（50）

AC117RNase A(400ul)

AC118RNase A(5ml)

AC110Proteinase K,30mg

AC111Proteinase K,100mg

AC112Proteinase K,1g

AC113OB Protease,30mg

AC114OB Protease,100mg

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