服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
| 腸道病毒70型和柯薩奇病毒A24型檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）說(shuō)明書(shū) | GOY-01P63867 | 50T |
儲(chǔ)存條件：
產(chǎn)品僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR：
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過(guò)對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得定量結(jié)果。因此，實(shí)時(shí)熒光定量PCR無(wú)需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí)，剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期（對(duì)數(shù)期），此時(shí)微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現(xiàn)性好，即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線(xiàn)性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對(duì)數(shù)存在線(xiàn)性關(guān)系，可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知樣品進(jìn)行定量測(cè)定，因此，實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴(lài)的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄為止定量準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好的定量方法，已得到全的公認(rèn)，廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究，藥物療效考核、病原體檢測(cè)等諸多域。
定量PCR方法：
a、競(jìng)爭(zhēng)法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競(jìng)爭(zhēng)性模板。在同一反應(yīng)管中，待測(cè)樣品與競(jìng)爭(zhēng)模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增（其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記）。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競(jìng)爭(zhēng)性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段，而待測(cè)模板不被酶切，可通過(guò)電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開(kāi)，分別測(cè)定熒光強(qiáng)度，根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記，下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí)，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長(zhǎng)度不同，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開(kāi)來(lái)，分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度，以?xún)?nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合，再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體－辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合物，終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn)，若加入內(nèi)標(biāo)，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的。
大腸埃希氏菌凋亡增強(qiáng)核酸酶抗體Human KLF17 ELISA Kit小鼠水通道蛋白3(AQP-3)免疫試劑盒
雞氏菌染色體脆弱性相關(guān)基因抗體Human KIR3DL1 ELISA Kit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)免疫試劑盒
貝葉多孔菌磷酸化蛋白激酶B抗體Human KLC1 ELISA Kit小鼠水通道蛋白1(AQP-1)免疫試劑盒
樟疫霉銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體Human KIR3DX1 ELISA Kit小鼠水通道蛋白0(AQP-0)免疫試劑盒
鏈格孢菌�；o酶A合成酶家族4抗體Human KIFAP3 ELISA Kit小鼠雙氫睪酮(DHT)免疫試劑盒
白色鏈霉菌白色亞種酸性磷酸酶樣蛋白2抗體Human KLF5 ELISA Kit小鼠瘦素(LEP)免疫試劑盒
陰溝腸桿菌AHNAK核蛋白2抗體Human KLF4 ELISA Kit小鼠嗜酸性粒陽(yáng)離子蛋白(ECP)免疫試劑盒
小孢根霉少孢變種二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體Human KIFC1( Kinesin family member C1) ELISA Kit小鼠嗜酸性粒過(guò)氧化物酶(EPO)免疫試劑盒
碳纖維單胞菌p53誘導(dǎo)蛋白5抗體Human KLF6 ELISA Kit小鼠嗜酸粒趨化因子(ECF)免疫試劑盒
陰溝腸桿菌（陰溝腸桿菌陰溝亞種）錨蛋白重復(fù)域5抗體Human KIFC3 ELISA Kit小鼠嗜酸粒趨化蛋白Eotaxin 3(Eotaxin 3)免疫試劑盒
糞腸球菌腦鈉通道蛋白2抗體Human KLF7 ELISA Kit小鼠嗜酸粒趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)免疫試劑盒
大麗花輪枝孢（棉花黃萎病菌）腦鈉通道蛋白4抗體Human KIN ELISA Kit小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)免疫試劑盒
肺炎克雷伯菌小腸鈉通道蛋白5抗體Human KLF15 ELISA Kit小鼠視黃結(jié)合蛋白(RBP)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌APXL蛋白抗體Human Kindlin 2 ELISA Kit小鼠生長(zhǎng)抑素(SS)免疫試劑盒
黑腐皮殼菌酸敏感離子通道蛋白3抗體Human KLF4 ELISA Kit小鼠生長(zhǎng)激素(GH)免疫試劑盒
河北木霉天門(mén)冬氨酸β羥化酶抗體Human KIF19 ELISA Kit小鼠生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)免疫試劑盒
桿菌狀鏈霉菌Streptomyces│bacillaris 質(zhì)量規(guī)格：>99.9%,BR白介素5試劑盒血竭素
鏈格孢Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR白介素4受體試劑盒西貝母堿苷
刺盤(pán)孢屬Colletotrichum│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BP白介素4試劑盒繡球酚
腸道病毒70型和柯薩奇病毒A24型檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）說(shuō)明書(shū)軟海綿酸鈉鹽；黑海棉酸鈉鹽
Okadaic acid sodium salt
產(chǎn)品規(guī)格： 高純
包 裝： 50微克
CAS號(hào)：209266-80-8
別：High purity grade
含量：≥98.0%
性狀：結(jié)晶或粉末。溶于DMSO：≥1mg/ml
用途：生化研究。Selective inhibitor of protein phosphatase Type I ａnd Type A2A sodium salt is more stable than free acid in oragnic solvents
保存：-20℃。保質(zhì)期2年
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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